根据麻疯树pepc基因和植物表达载体的酶切位点特征,分别将pepc基因全长序列3 000 bp正向插入pCAMBIA2300,构建了正义表达载体pCAMBIA-Jcpepc,基因片段597 bp反向插入pBI121构建了反义表达载体pBI-Jcpepc。通过农杆菌介导,采用叶盘法转化烟草,通过对转基因植株的PCR和PCR-Southern检测,表明pepc基因已经正向、反向插入烟草基因组中。测定了转基因烟草的PEPCase酶活性,并通过脂肪酸的测定,转正义pepc基因烟草叶片的脂肪酸含量平均比对照降低44.3%,转反义pepc基因植株脂肪酸含量平均比对照增加26.3%。

利用简单重复序列间扩增(ISSR)分子标记对分布于我国浙江和山东的8个山茶种群共240个个体进行了遗传结构分析。结果表明:筛选出的20条引物扩增得到210条清晰条带,其中184条为多态性条带,多态位点百分率(PPB)为87.62％。经POPGENE1.32软件分析,山茶种群平均多态位点百分率(PPB)为68.99％,Nei’s基因多样性指数(HE)为0.256 9,Shannon信息指数(H)为0.377 9,种群遗传多样性较高。基因分化系数Gst = 0.182 9,表明遗传变异主要存在于种群内个体间。地理距离与遗传距离具有显著相关性(r =0. 856 7, P<0.05),岛屿地理隔离对山茶种群的遗传分化具有重要影响。UPGMA聚类表明:浙江5个山茶种群间的遗传相似度较高,山东青岛的植物园种群和五四广场种群可能移植自长门岩岛。我国野生山茶资源受人为破坏严重,建议在加强现有岛屿自然种群就地保护力度的同时,建立山茶种质资源库,促进基因交流。

目的 研究金花茶组植物花朵及不同花器官中多酚组分的组成和含量，为多酚组分在金花茶植物分类中的应用提供参考。 方法 利用HPLC方法测定金花茶组22种植物全开期花朵的花瓣、雄蕊、萼片3类器官中9种多酚组分含量，并利用聚类分析方法解析其与金花茶组植物分类的关系。 结果 在所测的9种多酚组分中，GCG、ECG、CG在全部样品中均检测到，而GA、GC、EGC、C、EC、EGCG在不等数量的样品中未被检测到。多酚含量最高的组分为EC，其次是EGC、GCG和ECG，剩余5种组分含量很低，前4种组分是花朵多酚总量的主要成分。在3类器官中，多酚总量及EGC、C、EC、EGCG、GCG、ECG 6种组分含量的排序为：萼片>雄蕊>花瓣；CG组分含量的排序为：花瓣>雄蕊>萼片；GA和GC组分含量的排序为：雄蕊>萼片>花瓣。聚类分析发现，雄蕊多酚组分聚类结果与各分类系统的相似率最高，达80.00%～90.00%，萼片多酚分类结果相似率为75.00%～88.89%，花瓣多酚分类结果相似率为58.33%～81.82%。 结论 金花茶花朵中多酚组分含量最高的为EC，主要多酚组分为EC、EGC、GCG和ECG，在3类器官中多酚含量的排序为：萼片>雄蕊>花瓣。雄蕊多酚组分的聚类结果可以作为金花茶组植物系统分类的有效补充。

目的 通过对花青素苷相关合成基因的表达水平和代谢产物的分析，系统地阐明‘金华美女’叶色变异与基因表达的关系。 方法 以‘金华美女’为材料，‘贝拉大玫瑰’、杜鹃红山茶和红山茶为参照组，使用NCBI Primer Designing Tool设计山茶DFR、ANS、LAR、ANR和UFGT基因的荧光定量引物，使用实时荧光定量PCR仪测定这5个基因在叶片4个发育时期的表达量；采用高效液相色谱仪测定对应时期的多酚合成途径的主要次生代谢产物（儿茶素、表儿茶素），以及花青素苷合成途径的主要代谢产物矢车菊素-3-O-葡萄糖苷的含量。 结果 表明：（1）在4个时期中，红叶品种叶片中DFR基因表达量与对照组差异不显著，ANS、LAR、ANR和UFGT基因在4个时期的表达量与对照组存在显著差异，这说明‘金华美女’类黄酮代谢途径相关基因在表达水平上发生了改变；（2）‘金华美女’叶片中多酚含量明显低于对照组，其中，表儿茶素含量仅为0.04~0.21 mg·g^-1，这说明在生理水平上，‘金华美女’叶片中多酚合成途径可能受阻；（3）‘金华美女’叶片中矢车菊素-3-O-葡萄糖苷含量达1.2~1.4 mg·g^-1，4个生长阶段均显著高于对照组，这说明‘金华美女’叶片具备持续合成花青素苷的能力。 结论 根据试验结果，推断‘金华美女’叶色变异的主要原因可能是由于花青素还原酶基因的表达水平受到了抑制，降低了矢车菊素催化成表儿茶素的效率，使叶片类黄酮代谢途径中以多酚为主的合成方向转向花青素苷合成方向。

目的 鉴定分析金花茶花朵和叶片中主要化学成分、含量及其变化特征，为金花茶资源的进一步开发利用提供科学依据。 方法 利用超高效液相色谱-飞行时间质谱联用（UPLC-QTOF-MS）技术定性定量分析金花茶花瓣、雄蕊、老叶和新叶中花青苷、类黄酮及儿茶素类成分与含量。 结果 花青苷天竺葵素-3-O-葡萄糖苷和矢车菊素-3-O-葡萄糖苷均为金花茶中首次发现，其中，矢车菊素-3-O-葡萄糖苷仅存在于紫红色新叶中。类黄酮木犀草素-7-O-芸香糖苷和染料木苷为金花茶中首次发现，槲皮素-3-O-葡萄糖苷、槲皮素-7-O-葡萄糖苷、槲皮素-3-O-芸香糖苷和山柰酚-3-O-葡萄糖苷为金花茶叶片中首次发现。金花茶花瓣与雄蕊中花青苷相差不大，但却低于叶片尤其新叶；花朵中儿茶素类远高于叶片尤其新叶。金花茶花瓣和雄蕊中总黄酮及槲皮素-3-O-葡萄糖苷、槲皮素-3-O-芸香糖苷和山柰酚-3-O-葡萄糖苷均相差不大，但却远高于叶片。金花茶新叶中主要类黄酮成分木犀草素-7-O-芸香糖苷及总类黄酮明显高于老叶。 结论 金花茶中共鉴定出2种花青苷、6种类黄酮和2种儿茶素；槲皮素-3-O-葡萄糖苷等类黄酮是金花茶花朵呈现黄色的主要原因，矢车菊素-3-O-葡萄糖苷是金花茶新叶呈现紫红色的主要原因。

采用GCMS法从‘克瑞墨大牡丹'鲜花挥发油中鉴定出香气化合物37种,可分为醇类、烯醇氧化物类、醛类、酯类、烯类、酸类、烷烃类和菲类化合物等8类,其中醇类物质含量最高,占挥发油总量的54.84%。香气的主体特征成分为芳樟醇、顺芳樟醇氧化物II、水杨酸甲酯、二十四烷、芳樟醇旋光异构体、α松油醇、壬醛等7种化合物,芳樟醇含量占挥发油总量的39.97%。

Agrobacteriurn tumefaciens-mediated transformation (AtMT) method was used to study the genetic transformation in Rhizopus arrhizus of antisense expression vector pBI121-fad2 of VeFAD2 gene. We studied the key factors influencing transformation, such as A.tumefaciens strains,bacterial cell volume initially used, co-cultivation time, effective period and concentration of AS. The results shows that the ideal A.tumefaciens strain is AGL-1, the optimum bacterial cell volume initially used is 50-100 μL and co-culture 24 hours will get the most transformants. At co-culture period, AS induction is indispensable. It is beneficial to improve transformation ratio by adding to 200 μmol·L-1 AS at preincubate period and increasing AS concentration to 400-600 μmol·L-1 at co-culture period. It determined that antisense VeFAD2 gene has been integrated into the genome of R. arrhizus by PCR-Southern detection.

The effects of physical and chemical factors on the property of the mulberry pigment were studied. The results show that the light and heat affect the stability of the mulberry pigment. The pigment is stable with lower pH, but the color changes at weak acid level which is close to neutrality. The pigment has less resistance capability against oxidizing or reducing agent and it is sensitive to chelating agent or sodium benzoate. Glucose and sucrose have little effects on the pigment, but salt, citric acid or vitamin C can enforce the color of the pigment. Metal ions Co2+, Cu2+, Mg2+, Ca2+, Zn2+, Mn2+, K+, A13+, Sn2+ can strengthen the color, but Fe2+, Fe3+, and Pb2+ weaken the stability of the pigment.

利用ISSR分子标记技术对广西南宁金花茶公园29份金花茶组物种进行遗传关系分析。筛选出的14条引物扩增得到133条清晰条带，其中126条为多态性条带，多态性位点百分比为94.74%。29份金花茶种质材料的Nei’s基因多样性指数为0.360 6，Shannon’s 信息指数为0.531 4，遗传相似系数介于0.481 0.835，金花茶组物种的遗传基础较宽。用NTSYS软件对样品进行UPGMA聚类分析，29份金花茶样品聚为3大类群，其中扶绥中东金花茶单独为一类，顶生金花茶和龙州金花茶聚为一类，其它金花茶聚为一类。分析结果表明：夏石金花茶和小花金花茶的遗传相似系数最高，支持将两者归并到柠檬黄金花茶；弄岗金花茶和毛籽金花茶亲缘关系很近，支持合并到同一个种；龙州金花茶和薄叶金花茶分别归为单独的种。

应用RT-PCR和RACE法从麻疯树总RNA中分离出pepc基因全长cDNA,长度为3 142 bp,阅读框2 898 bp,编码965个氨基酸,在GenBank中登录,序列号为EU069413。它的氨基酸序列与蓖麻、陆地棉、橙、大豆、花生、烟草、油菜、拟南芥的氨基酸同源性分别为94.94%、92.46%、90.60%、90.50%、90.50%、88.33%、84.61%、82.44%。该基因编码了pepc基因家族中的pepc1,蛋白属于C3型PEPC。推测了pepc编码蛋白分子量为110.6 kD,并对其稳定性、二级结构、疏水性等特性进行了分析,最后确定了该蛋白的功能位点和结构域。